產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格(元) |
Hieff NGS? RNA Cleaner | 12602ES03 | 1 mL | 366.00 |
12602ES08 | 5 mL | 1066.00 | |
12602ES56 | 60 mL | 4266.00 | |
12602ES75 | 450 mL | 38566.00 |
產品描述
本試劑盒利用獨特的磁珠與緩沖液系統,可以特異性地吸附RNA,有效去除蛋白、鹽離子和其它雜質。常用于純化去除rRNA后的總RNA樣本,體外轉錄的RNA產物,RNA標記產物以及合成的RNA等。純化后的RNA適用于RNA文庫構建、RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northern Blot和RNAi等實驗。
運輸與保存方法
冰袋運輸。
2-8℃保存,有效期一年。避免冷凍!
使用方法
所需額外試劑:
100% 乙醇,Nuclease-free水,磁力架,Nuclease-free離心管。
實驗前準備:
(1)將RNA clean beads 從4 ℃取出,平衡至室溫(約30 min)。
(2)在一個Nuclease free PCR管中,用Nuclease-free水將0.5-5 μg總RNA稀釋至50 μL。
RNA純化:
(1)顛倒或渦旋振蕩使磁珠充分混勻,吸取2×磁珠(100 μL)加入總RNA樣品中(50 μL),用移液器吹打6次充分混勻。
(2)室溫孵育5 min,使RNA結合到磁珠上。
(3)將樣品置于磁力架上5 min,待溶液澄清后,小心移除上清。
(4)保持樣品置于磁力架上,加入200 μL新鮮配制的80%乙醇,漂洗磁珠,室溫孵育30 s,小心移除上清。
【注】漂洗時使用的80%乙醇需要使用Nuclease-free水新鮮配制,以防止引入RNase酶導致RNA降解。
(5)重復步驟4,共漂洗2次。
(6)保持樣品始終處于磁力架上,開蓋空氣干燥磁珠5 min。
【注】磁珠開蓋晾干時要避免過分干燥,如果磁珠出現龜裂,則提示磁珠過分干燥,此時RNA的洗脫效率會降低。
(7)將樣品從磁力架上取出,加入12 μL Nuclease-free 水,用移液器吹打6次以充分混勻,室溫靜置5 min。
(8)將樣品置于磁力架5 min,待溶液澄清后,小心轉移上清10 μL至一個新的Nuclease-free PCR管中。
【注】建議轉移上清時留2-3 μL液體,以免吸到磁珠影響后續實驗。得到的RNA極不穩定,建議盡快進入下一步。若
要保存,請置于-80℃保存。
注意事項
1)磁珠使用前一定要平衡到室溫后混勻,否則可能影響樣品的回收效率。
2)操作過程要嚴格保證無RNase酶和核酸污染。
3)80%乙醇需現用現配,否則將影響回收效率。
4)本試劑盒和其他試劑配套使用時,請按照具體實驗說明來進行操作。
5)本產品僅作科研用途!
結果展示:
使用總RNA純化試劑盒純化前后,RNA樣品qRT-PCR Ct值變化
RNA樣品 | 人 | 小鼠 | 擬南芥 | |||
檢測基因 | GAPDH | β-Actin | GAPDH | β-Actin | PP2A | TUB2 |
純化前Ct值 | 12.92 | 12.36 | 18.74 | 18.53 | 24.33 | 22.2 |
純化后Ct值 | 12.32 | 11.89 | 17.62 | 17.91 | 23.38 | 21.35 |
【注】使用Hieff NGS? RNA Cleaner可以有效去除影響RT-PCR的抑制劑,讓檢測結果更加真實。
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類別 | 名稱 | 貨號 | 規格 | 價格 |
DNA | 12599ES08/56 | 5/60 mL | 1666/9106 | |
12600ES08/56 | 5/60 mL | 1386/7586 | ||
Hieff NGS? DNA selection Beads(Superior Ampure XP alternative) | 12601ES08/56 | 5/60 mL | 986/6286 | |
RNA | 12602ES08/56 | 5/60 mL | 1066/4266 | |
12603ES24/96 | 24/96 T | 616/2266 |
HB190103