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    PNGase F(N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F)

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    產品說明書

    FAQ

    COA

    已發表文獻

    產品信息

     

    產品名稱

    產品編號

    規格

    價格(元)

    PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F

    20411ES01

    15000 U

    763.00

    20411ES02

    75000 U

    3373.00

     

    產品描述

     

    N-糖苷酶 F (PNGase F)是一種酰胺水解酶,經過和平空間站伊麗莎菌克隆,主要由腦膜炎膿桿菌等革蘭氏陰性菌分泌。并在 E. coli大腸桿菌中重組表達,可以裂解由天冬酰胺連接的高甘露糖、雜合和復雜的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位點為糖蛋白內側N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨殘基之間的酰胺鍵,同時將酶解后蛋白上的天冬氨酰轉化為天冬氨酸。本產品常應用于抗體及其相關蛋白完全去糖基化。

     

    產品性質

     

    中文別名Chinese synonym

    N-糖酰胺酶F;N-糖苷酶 F

    英文別名(English synonym

    PNGase F

    來源(Source

    大腸桿菌表達

    分子量(Molecular weight

    48.4 kDa

    比活性(Specific activity

    50000 U/mL

    緩沖液組分(Buffer

    20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA,50%Glycerol

    酶活定義(Unit Definition

    1個酶活力單位指在10 μL的反應體系中,37℃條件下1小時從10 μg變性RNase B中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。

     

    產品組分

     

    編號

    組分名稱

    組分成分

    產品貨號/規格

    20411ES01

    20411ES02

    20411-A

    PNGase F

    PNGase F

    15000 U

    75000 U

    20411-B1

    Buffer 110×

    5% SDS; 400 mM DTT

    150 μL

    750 μL

    20411-B2

    Buffer 210×

    200 mM Tris, PH 7.5

    300 μL

    1500 μL

    20411-B3

    10% NP-40

    10% NP-40 in MilliQ-H2O

    300 μL

    1500 μL

     

    運輸和保存方法

     

    干冰運輸;-20保存;有效期12個月。

     

    使用方法

     

    1、變性條件下蛋白質去糖基化:

    1)在水中加入1 μL Buffer 1目標糖蛋白(1-20 μg),至終體積10 μL;

    2100℃溫度下煮沸10 min使其變性,冰上冷卻,離心10;

    3)加入2 μLBuffer 2、2 μL10NP-40、6 μL去離子水,總反應體積20μL;

    4)加入2 μLPNGase,輕輕混勻。37℃孵育1-3 h。

    2、非變性條件下蛋白質去糖基化:

    1)在水中加入2 μLBuffer 2目標糖蛋白(1-20 μg至最終體積為 20 μL。

    2)加入 2~5 μL  PNGase F, 輕輕混勻。

    337°C 孵育 4-24 h。

    注意:在變性條件下大多數底物能夠更好的去糖基化,在非變性條件下可能需要增加PNGase F量和延長孵育時間。

     

    注意事項

     

    1、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

    2、本產品僅作科研用途!

    HB221031

     

    400-6111-883

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