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    Hifair? V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit

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    產品說明書

    FAQ

    COA

    已發表文獻

    產品信息

     

    產品名稱

    產品編號

    規格

    價格(元)

    Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit

    11147ES50

    50 T

    1453.00

    11147ES70

    200 T

    5493.00

    11147ES80

    1000 T

    21282.00

    11147ES92

    10000 T

    168882.00

     

    產品描述

     

    Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit是以RNA為模板進行多重定量PCR反應的試劑盒。在實驗的過程中,逆轉錄和定量PCR在同一反應管中進行,簡化了實驗操作,降低了污染的風險。

    本試劑盒利用耐熱Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一鏈cDNA,并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase進行定量擴增。本試劑盒主要包含優化的MP Buffer,Enzymes Mix等,緩沖液中已含有Mg2+dNTP等,并添加了有效抑制非特異性PCR擴增的因子和提升多重qPCR反應擴增效率的因子,能夠在保證引物擴增效率的同時,進行多達四重的反應。

     

    產品組分

     

    組分編號

    組分名稱

    產品編號/規格

    11147ES50

     (50 T)

    11147ES70

     (200 T)

    11147ES80

     (1000 T)

    11147ES92

    (10000 T)

    11147-A

    2×Hifair® V MP Buffer

    500 μL

    2×1 mL

    10 mL

    100 mL

    11147-B

    Hifair® V Enzyme Mix

    50 μL

    200 μL

    1 mL

    10 mL

    11147-C

    RNase Free H2O

    500 μL

    2×1 mL

    10 mL

    100 mL

    【注】1) 2×Hifair® V MP BufferMultiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer的簡寫。

    2) Hifair® V Enzyme Mix主要包含有耐熱Hifair® V Reverse TranscriptaseUNICON® HotStart Taq DNA Polymerase。

     

    適用機型

     

    ABI系列:ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus; 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 and 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;

    Bio-Rad系列:Bio-Rad CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;

    Roche系列:Roche Applied Science LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;

    其他系列:Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;

    Eppendorf Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;

    Qiagen Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;

    Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler; Illumina Eco qPCR.

     

    運輸與保存方式

     

    冰袋運輸。-20°C保存,有效期1年。本品避免反復凍融。建議分裝保存。

     

    注意事項

     

    1. 實驗過程中請使用RNase free耗材。

    2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

    反應體系(以20 μL為例)

    組分

    體積(μL)

    終濃度

    2×Hifair® V MP Buffer

    10

    Hifair® V Enzyme Mix

    1

    -

    Primer Mix (10 μM)

    各0.4

    0.2 μmol/L

    Probe Mix (10 μM)

    各0.2

    0.1 μmol/L

    模板 RNA

    1 pg-1 μg

    -

    RNase Free H2O

    To 20

    -

    【注】:使用前務必充分混勻,避免劇烈震蕩產生過多氣泡。

    a) 引物濃度:Primer Mix中包含多對引物,通常每條引物終濃度為0.2 μM,也可以根據情況在0.1-1.0 μM間進行調整。

    b) 探針濃度:Probe Mix中包含多條不同熒光信號的探針,每條探針的濃度可根據具體情況在50-300 nM間調整。

    c) 模板稀釋:qPCR靈敏度極高,建議將模板進行稀釋使用,控制Ct值在20-35之間適宜。

    d) 反應體系:推薦使用20 μL或50 μL,以保證目的基因擴增的有效性和重復性。

    e) 體系配制:請于超凈工作臺內配制,并使用無核酸酶殘留的槍頭、反應管;推薦使用帶濾芯的槍頭。避免交叉污染和氣溶膠污染。

     

    標準擴增程序

     

     

    反應階段

    溫度

    時間

    循環數

    1

    逆轉錄

    50°Ca

    15 min

    1

    2

    預變性

    95°C

    30sec

    1

    3

    擴增反應

    95°C

    10 sec

    45

    60°Cb

    30 secc

    【注】                                                                                            

    a) 逆轉錄:對于一些復雜模板或者高 GC 含量的 RNA 模板,可將逆轉錄溫度調整至 55℃,有利于提高擴增效率。

    b) 擴增反應:擴增反應溫度根據設計的引物Tm值進行調整。

    c) 熒光信號采集:不同的qPCR檢測儀器所需的熒光信號采集時間不同,請根據最短時間限制進行設置。

     

    相關產品

     

    原料應用類型

    產品名稱

    貨號

    假病毒

    COVID-19-pseudovirus(2019-nCOV假病毒)

    11900ES

    一步法RT-qPCR試劑

    Hieff Unicon® C58P1 nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit

    13173ES

    Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)

    13747ES

    鼠源RNase抑制劑

    Murine RNase Inhibitor (40 U/µL)

    10603ES

    熱啟動聚合酶

    Hieff UNICON® HotStart Direct Taq DNA Polymerase

    10717ES

    Taq酶單克隆抗體

    Hieff® anti-Taq DNA Polymerase Antibody

    31301ES

    Taq酶單克隆雙封閉抗體

    Hieff® Double-Block anti-Taq DNA Polymerase Antibody

    31303ES

    第五代耐熱逆轉錄酶

    Hifair® V Reverse Transcriptase

    11300ES

    熱敏UDG酶

    Uracil DNA Glycosylase (UDG), heat-labile

    10303ES

    Bst II DNA聚合酶

    Bst II DNA polymerase

    12908ES

    HB220302 

    400-6111-883

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