產品信息

 

產品名稱	產品編號	規格	價格（元）
Plasmid Agarose HP（超螺旋DNA純化介質）	20500ES25	25 mL	1200.00
	20500ES60	100 mL	3000.00
	20500ES76	500 mL	13000.00
	20500ES03	1 L	25000.00

 

產品描述

 

Plasmid Agarose HP 親和層析介質是一種新型高度交聯的親硫芳香族瓊脂糖層析介質，用于純化超螺旋 DNA，廣泛應用于基因治療和 DNA 疫苗的開發應用。該層析介質具有高流速、低反壓、非特異性吸附低、良好的親水性、化學穩定性和機械性特點，方便進行規模放大，可縮短生產時間，提高生產效率。

 

產品性質

 

基質（Matrix）	高度交聯的瓊脂糖凝膠
配基（Ligand）	巰基吡啶
配基密度（Ligand density）	27–50 µmol/mL
粒徑（Bead size）	36-44 µm
載量（Capacity）	＞3 mg/mL基質
耐壓（Tolerance Pressuremax）	0.3 MPa
最大流速（Maximum velocity）	220 cm/h
PH穩定性(PH stability)	3~13（長期），2~14（CIP，短期）
化學穩定性（Chemical stability）	在以下液體中穩定：所有常用的水相緩沖液；1mol/L 氫氧化鈉；70% 乙醇；40%異丙醇；1M 醋酸
儲存緩沖液（Buffer）	20%乙醇，4~30℃

 

運輸和保存方法

 

1.常溫運輸，避免日曬、雨淋、重壓。

2.密封保存在 4~30℃（保存溶液為 20%乙醇）干燥、通風、清潔處，不可冷凍；用過的柱子保存在 4~8℃，20%乙醇溶液中。

3.有效期5年。

 

注意事項

 

1.柱的選擇：從理論上說，只要柱足夠長，就可以獲得理想的分辨率，但由于層析柱流速同壓力梯度有關，柱長增加使流速減慢，峰變寬，分辨率降低；柱的直徑增加，使液體流動的不均勻性增加，分辨率明顯下降。

2.純化過程樣品與層析介質必須徹底平衡后，才能進行柱層析。

3.所裝的柱床必須表面平整，無溝流及氣泡，否則應重裝。

4.洗脫過程中應嚴格控制流速，且勿過快。

5.加樣及整個洗脫過程中，嚴防柱面變干。

6.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

7.本產品僅作科研用途！

 

使用方法

 

1 裝柱 

裝柱按照標準操作規程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度，凝膠裝柱前需要脫氣。

2 平衡

使用2~5倍柱床體積的上樣平衡液平衡柱子，務必使流出液的電導和 pH 同上樣緩沖液的 電導和pH完全一致。平衡液是含高濃度硫酸銨的Tris緩沖溶液，推薦緩沖液：2 M（NH₄）₂SO₄，10 mM EDTA，100 mM Tris-HCl，pH 7.5。

3 上樣

1）樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。

2）一般情況是讓目標產品結合在柱子上，用平衡液洗去雜質，再選擇一種洗脫液洗下目標產品。

4 洗脫

常用低濃度的硫酸銨溶液（1.7 M）加0.3 M氯化鈉溶液洗脫。

推薦洗脫液：100 mM Tris-HCl，1.7 M（NH₄）₂SO₄，10 mM EDTA, pH 7.5 + 0.3 M NaCl。 

5在位清洗

1）對于以離子鍵結合上去的蛋白，可用0.5~1倍柱床體積的2 M NaCl去除。

2）對于沉淀蛋白、疏水性結合的蛋白或脂類，一般先用1 mol/L NaOH 洗脫5倍以上柱體積，然后用結合蛋白時的平衡液洗到平衡即可。

3）對強疏水性結合的蛋白、脂類等，用4~10倍柱床體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗，需注意有機溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產生氣泡。

6再生

一般可用 100 mM Tris, 10 mM EDTA 洗脫5倍以上柱體積，然后用結合蛋白時的平衡液洗到平衡即可。  

                                          HB220524