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    Plasmid Agarose HP(超螺旋DNA純化介質)

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    產品說明書

    FAQ

    COA

    已發表文獻

    產品信息

     

    產品名稱

    產品編號

    規格

    價格(元)

    Plasmid Agarose HP(超螺旋DNA純化介質

    20500ES25

    25 mL

    1200.00

    20500ES60

    100 mL

    3000.00

    20500ES76

    500 mL

    13000.00

    20500ES03

    1 L

    25000.00

     

    產品描述

     

    Plasmid Agarose HP 親和層析介質是一種新型高度交聯的親硫芳香族瓊脂糖層析介質,用于純化超螺旋 DNA,廣泛應用于基因治療和 DNA 疫苗的開發應用。該層析介質具有高流速、低反壓、非特異性吸附低、良好的親水性、化學穩定性和機械性特點,方便進行規模放大,可縮短生產時間,提高生產效率。

     

    產品性質

     

    基質(Matrix)

    高度交聯的瓊脂糖凝膠

    配基(Ligand)

    巰基吡啶

    配基密度(Ligand density

    27–50 µmol/mL

    粒徑(Bead size)

    36-44 µm

    載量(Capacity)

    3 mg/mL基質

    耐壓(Tolerance Pressuremax

    0.3 MPa

    最大流速(Maximum velocity

    220 cm/h

    PH穩定性(PH stability)

    3~13(長期),2~14(CIP,短期)

    化學穩定性(Chemical stability)

    在以下液體中穩定:所有常用的水相緩沖液;1mol/L 氫氧化鈉;70% 乙醇;40%異丙醇;1M 醋酸

    儲存緩沖液(Buffer)

    20%乙醇,4~30℃

     

    運輸和保存方法

     

    1.常溫運輸,避免日曬、雨淋、重壓。

    2.密封保存在 4~30℃(保存溶液為 20%乙醇)干燥、通風、清潔處,不可冷凍;用過的柱子保存在 4~8℃,20%乙醇溶液中。

    3.有效期5年。

     

    注意事項

     

    1.柱的選擇:從理論上說,只要柱足夠長,就可以獲得理想的分辨率,但由于層析柱流速同壓力梯度有關,柱長增加使流速減慢,峰變寬,分辨率降低;柱的直徑增加,使液體流動的不均勻性增加,分辨率明顯下降。

    2.純化過程樣品與層析介質必須徹底平衡后,才能進行柱層析。

    3.所裝的柱床必須表面平整,無溝流及氣泡,否則應重裝。

    4.洗脫過程中應嚴格控制流速,且勿過快。

    5.加樣及整個洗脫過程中,嚴防柱面變干。

    6.了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

    7.產品僅作科研用途!

     

    使用方法

     

    1 裝柱 

    裝柱按照標準操作規程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度,凝膠裝柱前需要脫氣。

    2 平衡

    使用2~5倍柱床體積的上樣平衡液平衡柱子,務必使流出液的電導和 pH 同上樣緩沖液的 電導和pH完全一致。平衡液是含高濃度硫酸銨的Tris緩沖溶液,推薦緩沖液:2 M(NH42SO4,10 mM EDTA,100 mM Tris-HCl,pH 7.5。

    3 上樣

    1)樣品用平衡液配制,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。

    2)一般情況是讓目標產品結合在柱子上,用平衡液洗去雜質,再選擇一種洗脫液洗下目標產品。

    4 洗脫

    常用低濃度的硫酸銨溶液(1.7 M)加0.3 M氯化鈉溶液洗脫。

    推薦洗脫液:100 mM Tris-HCl,1.7 M(NH42SO4,10 mM EDTA, pH 7.5 + 0.3 M NaCl。 

    5在位清洗

    1)對于以離子鍵結合上去的蛋白,可用0.5~1倍柱床體積的2 M NaCl去除。

    2)對于沉淀蛋白、疏水性結合的蛋白或脂類,一般先用1 mol/L NaOH 洗脫5倍以上柱體積,然后用結合蛋白時的平衡液洗到平衡即可。

    3)對強疏水性結合的蛋白、脂類等,用4~10倍柱床體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,需注意有機溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產生氣泡。

    6再生

    一般可用 100 mM Tris, 10 mM EDTA 洗脫5倍以上柱體積,然后用結合蛋白時的平衡液洗到平衡即可。  

                                              HB220524

    400-6111-883

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