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    Coomassie Brilliant Blue G250考馬斯亮藍G250

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    Coomassie Brilliant Blue G250考馬斯亮藍G250

    20203ES10

    10 g

    室溫

    178.00


    產品描述

    考馬斯亮藍(Coomassie brilliant blue)是兩種相似三苯甲烷染料的總稱,有G250和R250兩種,結構上前者比后者多了2個甲基,命名上“G”為Green 的縮寫,因G250的藍色染料泛淺綠色;命名上“R”為Red的縮寫,因R250的藍色染料呈微紅色調;“250”表示考馬斯亮藍的純度。生化實驗中常將考馬斯亮藍用于蛋白定量和蛋白電泳中蛋白染色。工作原理是:通過與蛋白質內的氨基和羧基基團間的靜電結合作用以及范德華力,考馬斯亮藍與蛋白質形成強但非共價鍵連接的復合物。蛋白-染料復合物的形成穩定染料攜帶的負電荷陰離子(如磺酸基),從而產生在膜上或者膠上肉眼可見的藍色。

    考馬斯亮藍R250(Coomassie brilliant blue R250)更多用于電泳蛋白的染色,染色靈敏度比氨基黑高5倍,可達0.1 μg蛋白。但是染色背景比較深,需要褪色后才能進行蛋白條帶的觀察??捡R斯亮藍G250對蛋白膠染色的靈敏度相對較差,最低檢測到0.5 μg蛋白。但是因其在三氯乙酸中不溶而以膠體形式存在,選擇性的和蛋白質結合形成復合物,染色迅速,著色深的蛋白質條帶數秒內可以顯現出來,約45 min后著色最深。而且染色背景低,不需要脫色即可進行蛋白條帶的觀察。因此,非常適合對電泳凝膠蛋白的快速定性分析。

    考馬斯亮藍G250較多的用于溶液體系中蛋白的定量分析,即Bradford蛋白結合檢測法(Bradford protein-binding assay),此方法利用的就是G250與蛋白質結合的特性,Bradford試劑(也就是酸化的G250溶液)為陽離子,主要為雙質子化,溶液為紅色,其最大吸收波長(Amax)為470 nm。當與蛋白穩定結合后,G250以陽離子,非質子化的形式存在,溶液變為藍色,最大吸收波長遷移到595 nm。藍色陽離子形式染料的量與樣本中蛋白的量成正比,因此通過直接測定595 nm的吸光度來反映蛋白量。此法的優點在于G250與蛋白質結合所需的時間較短(約2 min左右),且結合的G250-蛋白質復合物室溫下約1 h內保持穩定。反應靈敏度高,是一種非常常用的微量蛋白快速定量方法。


    產品性質

    中文別名(Chinese synonym)

    酸性藍90;考馬斯亮藍G;康美賽藍G250

    英文別名(English synonym)

    Acid blue 90 Coomassie Brilliant Blue G

    CAS號(CAS NO.)

    6104-58-1

    分子式(Formula)

    C47H48N3NaO7S2

    分子量(Molecular weight)

    854.02

    外觀(Appearance)

    藍色至紅色結晶粉末

    溶解性(Solubility)

    微溶于水,最好先溶于甲醇或者乙醇

    結構式(Structure)

    QQ圖片20180901103757.png


    輸與保存方法

    室溫運輸和保存即可。


    使用方法

    1.快速染色步驟(考馬斯亮藍G250)
    1)考馬斯亮藍G250染色液的配制

    將0.2 g G250溶于100 mL水中(需要加熱至50°C促進溶解)。冷卻后,加入100 mL 2 N H2S04。室溫放置3 h-過夜,然后濾紙除雜。過濾后的溶液,小心加入22.2 mL 10 N KOH,然后加入28.7 g TCA?;靹蚝笫覝胤胖?gt;3 h,再次過濾除雜從而獲得琥珀般的棕色溶液,不含藍色沉淀。

    2)染色只需將膠完全浸在此染色液中,約15 min后條帶就會顯示出來。幾個小時后染色條帶的亮度和靈敏度會進一步加強。

    3)染色液室溫約穩定存放2-3周。

    2.Bradford蛋白定量檢測(考馬斯亮藍G250)
    參考Bradford Protein Quantification Kit Bradford蛋白濃度測定試劑盒(貨號:20202ES76)的操作步驟。


    注意事項

    1)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

    2)本產品僅作科研用途!

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    20202ES76

    Bradford Protein Quantification Kit Bradford蛋白濃度測定試劑盒

    500 T

    400-6111-883

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