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    Coomassie Brilliant Blue R250考馬斯亮藍R250

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    價格(元)

    Coomassie Brilliant Blue R250考馬斯亮藍R250

    20310ES10

    10 g

    室溫

    189.00

    Coomassie Brilliant Blue R250考馬斯亮藍R250

    20310ES25

    25 g

    室溫

    385.00


    產品描述

    考馬斯亮藍(Coomassie brilliant blue)是兩種相似三苯甲烷染料的總稱,有G250和R250兩種,結構上前者比后者多了2個甲基,命名上“G”為Green的縮寫,因G250的藍色染料泛淺綠色;命名上“R”為Red的縮寫,因R250的藍色染料呈微紅色調;“250”表示考馬斯亮藍的純度。生化實驗中常將考馬斯亮藍用于蛋白定量和蛋白電泳中蛋白染色。工作原理是:通過與蛋白質內的氨基和羧基基團間的靜電結合作用以及范德華力,考馬斯亮藍與蛋白質形成強但非共價鍵連接的復合物。蛋白-染料復合物的形成穩定染料攜帶的負電荷陰離子(如磺酸基),從而產生在膜上或者膠上肉眼可見的藍色。

    考馬斯亮藍R250(Coomassie brilliant blue R250)更多用于電泳蛋白的染色,染色靈敏度比氨基黑高5倍,可達0.1 μg蛋白。R250染色后需要褪色,才能進行蛋白條帶的觀察。

    考馬斯亮藍G250的檢測靈敏度雖然較低,但也可替代R250,使用一種快速而簡單的方法進行蛋白染色。因其具有以下特性,即在低于pH 2.0時,溶液無色;pH 7.0時溶液呈深藍黑色;若發生酸化,溶液呈現透明的棕褐色。當G250與蛋白結合,溶液又回到藍色,主要因為蛋白分子周圍具有更偏中性的pH環境。合適條件下,當把膠放在酸化的G250溶液中染色,顯示出藍色的蛋白條帶,背景呈淺琥珀色。此種方法條帶快速顯色,且背景顏色也很淺使得條帶看起來很清楚,則不需要做褪色處理。大部分蛋白用G250檢測的下限是0.5 μg。雖然靈敏度降低,取而代之的是操作快速以及方便,比R250染色節省高達11 h。


    產品性質

    中文別名(Chinese synonym)

    考馬斯亮蘭R250;酸性藍83;酸性艷藍6B;亮藍R;

    英文別名(English synonym)

    Brilliant Blue R; Brilliant Indocyanine 6B;   C.I. number 42660; Acid Blue 83;

    CAS號(CAS NO.)

    6104-59-2

    分子式(Formula)

    C45H44N3NaO7S2

    分子量(Molecular weight)

    825.97

    外觀(Appearance)

    暗紅色至深暗紅或暗色粉末

    溶解性(Solubility)

    溶于熱水(1 mg/mL),乙醇和甲醇

    結構式(Structure)

    QQ圖片20180901105035.png          



    運輸與保存方法

    室溫運輸和保存即可。


    使用方法

    1.標準染色步驟(考馬斯亮藍R250)

    1) 蛋白電泳凝膠置于50%甲醇,10%醋酸,40%水溶液中固定,水平搖床上低速搖動30 min~過夜。

    2)去除固定液,更換0.25%考馬斯亮藍R250染色液(0.25% R250溶于50%甲醇,10%醋酸,40%水溶液)完全覆蓋住膠,染色2-4 h。直至膠染成均勻的藍色。
    注意:當膠在染色液內肉眼不可見時,說明染色完成,否則與深色的染色液對比,凝膠區域看起來顏色偏淺。

    3)將膠重新放置在5%甲醇,7.5%醋酸,87.5%水溶液中脫色4-24 h。約1-2 h后蛋白條帶即可看到,直至背景變透明后脫色才結束。中間可更換2-4次脫色液。

    注意:此方法可檢測到的蛋白量最低達到0.1 μg蛋白/條帶。

    4)將膠存放在7%醋酸中。也可以放在水中或者干燥保存。


    2.快速染色步驟(考馬斯亮藍R250)

    1)蛋白電泳凝膠在25% IPA,10%醋酸的水溶液中固定30-60 min。

    2)將膠放置在10%醋酸的水溶液中進行染色,含有60 μg/mL的考馬斯亮藍R250。約30 min后條帶顯示,讓膠繼續染色直至達到理想的蛋白條帶。在此染色方法中膠的背景染色比較淺,由于使用膠的濃度很低。

    3)將膠重新放在10%醋酸溶液中脫色2 h或更長。期間可更換2-4次脫色液。

    4)將膠存放在7%醋酸中。也可以放在水中或者干燥保存。


    注意事項

    1)0.25%考馬斯亮藍R250染色液配置的過程中,需要先用甲醇溶解R250粉末后,再加入醋酸和水,一般情況下不需要濾紙除雜。溶液可在4℃存放6個月,若長時間保存出現沉淀,可用濾紙過濾得到澄清液體。

    2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
    3)本產品僅作科研用途!


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