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產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格（元） |
Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/μL) 蝦堿性磷酸酶 | 10322ES72 | 250 U | 656.00 |
產品描述
Alkaline Phosphatase，中文名堿性磷酸酶，可將DNA、RNA的5’端磷酸基團去除，常用于阻止載體的自連作用：在分子克隆實驗中，DNA連接酶催化DNA連接時需要有磷酸基團的存在，載體在經酶切后會在切點端保留一個磷酸基團。而載體經堿性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端無磷酸基團，因而不可以和自身3’ 端連接。因此連接反應中載體本身會優先發生的連接反應被阻止，提高了目的片段插入率。另外，堿性磷酸酶還可制備用于5’端標記的DNA模板。
本品為蝦來源的堿性磷酸酶，可以降解幾乎所有磷酸單酯，但是該酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。該酶作用于末端去磷酸化，無論末端為粘端，還是平端。SAP 也可以用來降解PCR 反應中的dNTP，用于后續測序和SNP分析。
產品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產品編號/規格 |
10322ES72（250 U） | ||
10322-A | Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/μL) | 250 U |
10322-B | 10×SAP buffer | 1 mL |
產品性質
來源（Source） | 來自畢赤酵母，克隆有北極蝦（Pandalus rorealis）的蝦堿性磷酸酶基因 |
質量控制（Quality Control） | 無核糖核酸酶、脫氧核糖核酸酶污染 |
純度（Purity） | ＞95% |
熱滅活（Thermal Inactivation） | 65℃溫浴5 min，活性完全不可逆喪失 |
活性定義（Unit definition） | 在25℃條件下，30分鐘能使1 μg經HindⅢ(產生5’突出末端)消化的pUC19 DNA去磷酸化所需的酶量定位為1個活力單位。 |
運輸和保存方法
冰袋運輸。-20℃保存，有效期3年。
注意事項
1）1×SAP Buffer: 50mM Bis-Tris HCl (pH 6.0)，1 mM MgCl2，0.1 mM ZnCl2，25℃溫育。
2）熱失活：65℃加熱5分鐘，不可逆失活。當完成去磷酸化反應后，無需純化產物，可以直接用于后續連接反應。
3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
4) 本產品僅作科研用途!
使用方法
DNA去磷酸化
① 在EP管中加入下列試劑*：
組分 | 體積 |
DNA 片段** | 1 pmol |
10×rSAP buffer | 2 μL |
Shrimp Alkaline Phosphatase (1 U/μL) | 1 μL |
無菌ddH2O | Up to 20 μL |
【*】可根據比例相應放大反應體系。
【**】1 pmol DNA片段量約相當于1 ug 3kb大小的質粒。
② 混勻上述試劑，于25℃孵育30 min。
③ 將EP管65℃，5 min溫浴，終止反應。
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產品名稱 | 貨號 | 規格 |
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Exonuclease I (E. coli) I型核酸外切酶 | 10320ES81/93 | 1500 U/15000 U |
HB220114
400-6111-883
