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    Shrimp Alkaline Phosphatase(SAP)(1U/μl) 蝦堿性磷酸酶

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    產品說明書

    FAQ

    COA

    已發表文獻

    產品信息

     

    產品名稱

    產品編號

    規格

    價格(元)

    Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/μL) 蝦堿性磷酸酶

    10322ES72

    250 U

    656.00

     

    產品描述

     

    Alkaline Phosphatase,中文名堿性磷酸酶,可將DNA、RNA的5’端磷酸基團去除,常用于阻止載體的自連作用:在分子克隆實驗中,DNA連接酶催化DNA連接時需要有磷酸基團的存在,載體在經酶切后會在切點端保留一個磷酸基團。而載體經堿性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端無磷酸基團,因而不可以和自身3’ 端連接。因此連接反應中載體本身會優先發生的連接反應被阻止,提高了目的片段插入率。另外,堿性磷酸酶還可制備用于5’端標記的DNA模板。

    本品為蝦來源的堿性磷酸酶,可以降解幾乎所有磷酸單酯,但是該酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。該酶作用于末端去磷酸化,無論末端為粘端,還是平端。SAP 也可以用來降解PCR 反應中的dNTP,用于后續測序和SNP分析。

     

    產品組分

     

    組分編號

    組分名稱

    產品編號/規格

    10322ES72(250 U)

    10322-A

    Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/μL)

    250 U

    10322-B

    10×SAP buffer

    1 mL

     

    產品性質

     

    來源(Source)

    來自畢赤酵母,克隆有北極蝦(Pandalus rorealis)的蝦堿性磷酸酶基因

    質量控制(Quality Control)

    核糖核酸酶、脫氧核糖核酸酶污染

    純度(Purity)

    >95%

    熱滅活(Thermal Inactivation)

    65溫浴5 min,活性完全不可逆喪失

    活性定義(Unit definition)

    在25℃條件下,30分鐘能使1 μg經HindⅢ(產生5’突出末端)消化的pUC19 DNA去磷酸化所需的酶量定位為1個活力單位。

     

    運輸和保存方法

     

    冰袋運輸。-20保存,有效期3年。

     

    注意事項

     

    11×SAP Buffer: 50mM Bis-Tris HCl (pH 6.0),1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2,25℃溫育。

    2)熱失活:65℃加熱5分鐘,不可逆失活。當完成去磷酸化反應后,無需純化產物,可以直接用于后續連接反應。

    3)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

    4) 本產品僅作科研用途!

     

    使用方法

     

    DNA去磷酸化

     EP管中加入下列試劑*:

    組分

    體積

    DNA 片段**

    1 pmol

    10×rSAP buffer

    2 μL

    Shrimp Alkaline Phosphatase (1 U/μL)

    1 μL

    無菌ddH2O

    Up to 20 μL

    *可根據比例相應放大反應體系。

    **1 pmol DNA片段量約相當于1 ug 3kb大小的質粒。

     混勻上述試劑,于25孵育30 min。

     EP管65,5 min溫浴,終止反應。

     

    相關產品

     

    產品名稱

    貨號

    規格

    Alkaline Phosphatase (30 U/μL), Calf Intestine (CIAP) 小牛腸堿性磷酸酶

    10321ES80

    1000 U

    Exonuclease I (E. coli)  I型核酸外切酶

    10320ES81/93

    1500 U/15000 U

     

    HB220114


    400-6111-883

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