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    Human DiI-Low Density Lipoprotein(Human DiI-LDL) 紅色熒光標記人源低密度脂蛋白

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    Human DiI-Low Density Lipoprotein (Human DiI-LDL) 紅色熒光標記人源低密度脂蛋白

    20614ES76

    500μg

    4oC避光

    2855.00


    產品描述

    低密度脂蛋白(Low Density Lipoprotein,簡稱為LDL)是通過脂蛋白酯酶的水解作用,脫去極低密度脂蛋白(VLDL)中的甘油三脂,釋放游離脂肪酸轉化而來的。因甘油三酯的去除使得膽固醇所占比例提高,增加顆粒本身密度,從而得到LDL。LDL與脊椎細胞表面的受體特異性結合,然后通過受體介導的內吞作用將膽固醇運輸到全身各處細胞。因此,LDL可以用來研究受體介導的內吞作用過程,尤其是在動脈粥樣硬化等疾病中,血漿來源的LDL還可用于研究LDL在功能和代謝中的氧化作用。

    紅色熒光標記人源低密度脂蛋白(Human DiI-LDL)是標記熒光探針Dil(1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'- tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate)的LDL,可以用來觀察培養細胞的LDL結合位點,或篩選LDL受體表達缺陷型細胞突變株。也可以通過流式細胞術評估細胞受體水平,或檢測組織內的受體水平。 DiI-LDL是研究細胞內吞作用非常好的標記物。

    翌圣提供的Human DiI-LDL為無菌包裝,可以直接稀釋使用。除提供DiI-LDL,我們還提供不帶標記的LDL,以及修飾化的LDL如乙?;疞DL(Ac-LDL),以及氧化修飾的LDL(Ox-LDL)。


    制備方法

    純化的人健康血漿來源的LDL直接標記上DiI熒光探針,然后通過超速離心以及透析的方法純化回收標記產物,并濾膜過濾除菌。純化的DiI-LDL溶于含0.02 mM EDTA的PBS,pH 7.4中。


    產品性質

    濃度(Concentration)

    0.8-3.0 mg/ml

    外觀(Appearance)

    乳狀液體

    吸光度比例(Absorbance   Ratio)

    Dil/Protein=555nm/275nm=1.30

    緩沖液組分(Buffer   Components)

    0.02 mM EDTA in PBS,   pH 7.4


    運輸與保存方法

    冰袋運輸;

    4oC無菌避光,收到貨后可穩定保存6周。千萬不可凍存!使用時一定要無菌操作!


    注意事項


    1)本品的稀釋工作液極不穩定,建議即配即用;

    2)長期貯存可能會有沉淀析出,屬于正?,F象,低速離心2 min去除沉淀即可使用;

    3)LDL與LDL受體的結合需要Ca2+和Mn2+的參與,過量EDTA的存在會抑制其結合;

    4)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操。
    5)  本產品僅作科研用途!


    操作步驟

    1)工作液制備:無菌條件下,將DiI-LDL用細胞培養基稀釋至20-40 μg/ml。

    2)細胞準備:吸除培養板內培養基,向活細胞內加入上述LDL,37℃培養4-5小時。

    3)孵育結束,吸去含有Human DiI-Ox-LDL的培養基,并用無探針的培養基洗幾次。

    4)根據實驗需求用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測。

    a)熒光顯微鏡觀察

    采用標準的羅丹明激發:發射濾光片(或建議使用波長為:Ex/Em=549nm/565nm);若需要請使用含3%甲醛的PBS進行固定,切勿使用甲醇或丙酮固定,因Dil易溶于有機溶劑。注:需設陽性細胞以做對照。

    b)細胞分選(流式細胞術)

    胰蛋白酶處理細胞或者加入EDTA制成單細胞懸液,選用合適的已標記純化細胞用作陰性和陽性對照,從而進行流式分選設門(gate)。(建議使用波長為Ex: 488/514/549nm; Em: 565nm)。


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    400-6111-883

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