面對突發性、傳染性強、不明病因的疾病，需要可靠、快速手段鎖定病原。毫無疑問，mNGS將病原一網打盡并在24h內出具報告，成為病原檢測的一把利劍。mNGS不需要培養，直接對樣本核酸進行高通量測序，能夠快速、無偏差的檢測臨床樣本中的全部病原。其檢測流程可以分為5個步驟：核酸提取、文庫構建、上機測序、生信分析與報告解讀。
 

 

mNGS檢測流程圖
 

 

翌圣 mNGS濕實驗完整解決方案
 

宏基因組建庫性能
 

主推產品：Hieff NGS® OnePot II DNA Library Prep Kit for Illumina®（Cat#13490）

產品特點：

1）起始兼容廣：適用500pg-1μg的gDNA、全長cDNA等樣本

2）操作簡單：片段化/末修/加A一步完成，建庫時間低至3h

3）極低背景：工藝優化，嚴苛質檢，背景菌殘留低，特別適合病原建庫

產品性能：

1）建庫性能：不同批次13490試劑盒，酶切 4℃1min；30℃ 20min；72℃ 20min；4℃ Hold，結果表明，不同類型樣本，不同投入量情況下，均能建庫成功
 

表1、不同樣本、不同起始量樣本文庫產出

圖1、不同樣本、不同起始量樣本文庫大小
 

2）背景殘留：兩個批次13490試劑盒（C、S），小牛胸腺DNA，500 pg、1μg Input 酶切時間20min，14cycles，illumina，PE150，20M reads/樣，結果表明，兩個批次背景菌殘留菌較低，批次間穩定建較好
 

 

圖2、兩個批次試劑500 pg、1μg Input背景菌殘留結果
 

產品詳情

分類		產品名稱	產品編號	規格
DNA建庫	機械法建庫	Hieff NGS® Ultima DNA Library Prep Kit for Illumina®	12199ES08/ES24/ES96	8 T/24 T/96 T
		Hieff NGS® Ultima DNA Library Prep Kit for MGI®	13310ES16/ES96	16 T/96 T
	酶切法建庫	Hieff NGS® OnePot Ⅱ DNA Library Prep Kit for Illumina®	13490ES08/ES24/ES96	8 T/24 T/96 T
		Hieff NGS® OnePot II DNA Library Prep Kit for MGI®	13509ES16/ES96	16 T/96 T
	酶切PCR-free建庫	Hieff NGS® OnePot Pro PCR-Free DNA Library Prep Kit for Illumina®	12209ES08//ES24/ES96	8 T/24 T/96 T
	轉座酶建庫	Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®	12206ES08/ES24/ES96; 12207ES08/ES24/ES96	8 T/24 T/96 T; 8 T/24 T/96 T

 

宏轉錄組建庫性能
 

主推產品：Hieff NGS® Fast RNA Library Prep Kit for Illumina®(Cat#12304)

產品特點：

1) 起始兼容廣：10~500 ng RNA建庫

2) 極速建庫：將傳統約3.5h建庫時間縮短到3 h

3) 極低背景：工藝優化，嚴苛質檢，背景菌殘留低，特別適合病原建庫

產品性能：

1）Control為12253+12252（常規RNA建庫），不同起始量293 RNA 為樣本建庫測序，結果表明，不同起始量文庫產出、基因表達數量檢出均正常
 

表2、不同起始量RNA文庫產出

 

 

圖3、不同起始量RNA建庫基因表達數量

 

2）不同起始量293 RNA ，illumina，PE150，20M reads，結果表明，大腸殘留均較低
 

 

圖4、不同起始量ENA建庫，大腸殘留檢測

 

產品詳情

分類		產品名稱	產品編號	規格
RNA建庫	rRNA去除/珠蛋白去除	Hieff NGS® One-Step rRNA Remova Kit/Hieff NGS® One-Step Globin mRNA Removal Kit(Human)	12258ES08//ES24/ES96 12259ES08//ES24/ES96 12260ES08/ES24/ES96	8 T/24 T/96 T; 8 T/24 T/96 T; 8 T/24 T/96 T
	常規RNA建庫	Hieff NGS® Ultima Dual-mode RNA Library Prep Kit for Illumina®	12252ES08/ES24/ES96	8 T/24 T/96 T
		Hieff NGS® Ultima Dual-mode RNA Library Prep Kit for MGI®	13333ES08//ES24/ES96	8 T/24 T/96 T
	極速RNA建庫	Hieff NGS® Fast RNA Library Prep Kit  for Illumina®	12304ES08/ES24/ES96	8 T/24 T/96 T

 

RNA&DNA共建庫性能
 

主推產品：Hieff NGS® ds-cDNA Synthesis Kit（Cat#13488)

Hieff NGS® OnePot cDNA&gDNA Library Prep Kit（Cat#13502）

產品特點：

1) 起始兼容廣：500pg-1μg RNA、DNA均能建庫成功

2) 模塊自由組合：Cat#13502可進行DNA建庫，搭配Cat#13488可進行DNA&RNA共建庫，模塊靈活搭配，經濟便捷

3) 極速建庫：3h內完成共建庫

產品性能：

1）建庫性能

不同起始量標準品RNA、小牛gDNA進行建庫測序，500pg-1μg RNA、DNA均能建庫成功
 

表3、不同gDNA投入文庫產出

 

 

 

表4、不同RNA投入文庫產出

 

 

2）背景殘留

表5、不同gDNA投入背景殘留

 

 

表6、不同RNA投入背景殘留

 

 

產品詳情

分類		產品名稱	產品編號	規格
DNA&RNA共建庫	RNA一、二鏈合成	Hieff NGS® ds-cDNA Synthesis Kit	13488ES08/ES24/ES96	8 T/24 T/96 T
	Illumina&MGI DNA建庫	Hieff NGS® OnePot cDNA&gDNA Library Prep Kit	13502ES08/ES24/ES96	8 T/24 T/96 T

 

tNGS多重擴增試劑
 

主推產品：Hieff® HG Multiplex PCR Master Mix Library Prep Kit (Cat#13283）

產品特點：

1) 性能優：高均一性、高特異性和高靈敏度

2) GC兼容廣：兼容GC含量在25%-70%

3) 性能優：高均一性、高特異性和高靈敏度

4) 操作簡潔：預混液包含除引物和DNA模板之外所有組分

產品性能：

YS自設panel 35對GC 70-80；95對GC 27-72.5； 130對GC 27-80，和競品A、B測序比較，結果顯示，GC含量在25%-70%左右基因區域均得到穩定擴增、均一性優于競品
 

表7、不同GCpanel擴增測序結果

 

圖5、不同GC覆蓋結果

 

產品詳情

分類		產品名稱	產品編號	規格
tNGS（多重PCR）建庫	擴增Mix	Hieff® HG Multiplex PCR Master Mix Library Prep Kit	13283ES03/ES08/ES50/ES60/ES76	1 mL/5×1 mL/50 mL/250 mL/500 mL

 

建庫必備

分類		產品名稱	產品編號	規格
接頭	長接頭	Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®	13519ES04/ES16；13520ES04/ES16	48×4 T/48×16T; 48×4 T/48×16T
		Hieff NGS® Complete Adapter Kit for MGI®	13360ES02/ES04/ES96; 13361ES02/ES04/ES96; 13362ES02/ES04/ES96	8×2 T/8×4 T/8×100 T; 16×2 T/16×4 T/16×100 T; 96×2 T/96×4 T/96×100 T
	短接頭	Hieff NGS® 384 CDI Primer for Illumina®	12412ES02； 12413ES02	96×2 T; 96×2 T
		Hieff NGS® Unique Dual Index Primer Kit for MGI®	13451ES02/ES04; 13452ES02/ES04; 13453ES02/ES04; 13454ES02/ES04;	48×2 T/48×4 T; 48×2 T/48×4 T; 48×2 T/48×4 T; 48×2 T/48×4 T
文庫定量	Qubit定量	1×dsDNA HS Assay Kit for Qubit®	12642ES60/ES76	100 T/500 T
		dsDNA HS Assay Kit for Qubit®	12640ES60/ES76	100 T/500 T
	qPCR定量	Hieff NGS® Library Quantification Kit for Illumina®, qPCR Master Mix	12302ES05	500 T
		Hieff NGS® Library Quantification Kit for Illumina®, DNA Standard 1-6	12307ES09	6×96 μL
磁珠	DNA純化	Hieff NGS® DNA Selection Beads	12601ES03/ES08/ES56/ES75	1 mL/5 mL/60 mL/450 mL
	RNA純化	Hieff NGS® RNA Cleaner	12602ES03/ES08/ES56/ES75	1 mL/5 mL/60 mL/450 mL